高效液相色譜儀是一種基于色譜技術(shù)的分析儀器，具有高分離能力、高靈敏度和廣泛的應(yīng)用范圍。它在化學(xué)、生物、制藥、環(huán)境和食品等領(lǐng)域中扮演著重要的角色。基于液相色譜技術(shù)，通過樣品在固定相上的分配和吸附作用來實(shí)現(xiàn)分離。它利用高壓泵將流動(dòng)相（溶劑）推動(dòng)通過色譜柱，樣品溶液通過柱時(shí)，不同成分因?yàn)樵诠潭ㄏ嗌系南嗷プ饔昧Σ煌蛛x出來。通過調(diào)整流動(dòng)相的性質(zhì)和梯度條件，可以實(shí)現(xiàn)對復(fù)雜樣品的高效分離。
1、柱壓問題
壓力過高：可能是由于流路中有堵塞。此時(shí)應(yīng)分段進(jìn)行檢查，如斷開真空泵入口處、打開Purge閥等，以確定堵塞位置并進(jìn)行處理。
壓力過低：通常是由于系統(tǒng)泄漏或泵內(nèi)進(jìn)了空氣。處理方法包括尋找泄漏點(diǎn)并旋緊、用專用針筒在排空閥處吸出氣泡等。
2、漂移問題
基線漂移：可能由柱溫波動(dòng)、流通池污染、紫外燈能量不足、流動(dòng)相污染或變質(zhì)等原因引起。解決方法包括控制好柱子和流動(dòng)相的溫度、用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池、更換新的紫外燈、檢查流動(dòng)相組成等。
保留時(shí)間漂移：溫控不當(dāng)、流動(dòng)相比例變化、色譜柱沒有平衡、流速變化、泵中有氣泡等因素都可能導(dǎo)致保留時(shí)間漂移。解決方法包括調(diào)好柱溫、檢查四元泵的比例閥是否有故障、給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱、重新設(shè)定流速、從泵中除去氣泡等。
3、峰形異常問題
色譜圖中未出峰可能是由于系統(tǒng)未進(jìn)樣、樣品分解、泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確等原因。解決方法是針對以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整。
出現(xiàn)負(fù)峰、寬峰、雙峰或肩峰、前伸峰、拖尾峰等問題時(shí)，需要根據(jù)具體情況分析原因并采取相應(yīng)的解決措施，如調(diào)整進(jìn)樣量、樣品濃度、保護(hù)柱或色譜柱的狀態(tài)等。
4、色譜柱相關(guān)問題
篩板堵塞：會(huì)導(dǎo)致柱壓升高、色譜峰拖尾等問題。解決方法是分析樣品前先過濾或離心，使用在線過濾器等。
強(qiáng)保留樣品組分：會(huì)吸附在柱頭填料上，影響色譜柱壽命。解決方法是定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
裝填不良：會(huì)導(dǎo)致柱效突然降低。解決方法是選擇填充良好的色譜柱，并在低柱壓下操作以減少損壞。
